蛹虫草菌丝体多糖提取方法的研究

 蛹虫草属真菌类物质，其菌丝体具有很高的药用价值和营养价值，尤其是菌丝体中含有的多糖应用十分广泛并有较高的应用价值和开发潜力。
实验以蛹虫草菌丝体为原材料，以多糖的提取率为考察指标，比较了热水浸提法，超声波提取法和微波提取法对蛹虫草菌丝体中多糖的提取效果，并利用苯酚－硫酸法测定其多糖含量。实验结果表明，热水浸提法对菌丝体多糖的提取效果最佳，其次是超声波提取法和微波提取法。并采用正交实验法对影响有效成份提取的工艺条件进行了优化，最终确定蛹虫草菌丝体多糖提取的最佳工艺条件为：提取温度80℃，提取时间3h，提取次数为3次，液料比为10:1。

关键词：蛹虫草菌丝体；多糖；提纯；正交试验法
摘 要 I
Abstract II
第一章 前 言 1
第二章 文献综述 2
2.1 蛹虫草菌丝体 2
2.1.1 概述 2
2.1.2 成分 3
2.2 蛹虫草菌丝体多糖 5
2.2.1蛹虫草菌丝体多糖的结构 6
2.2.2蛹虫草菌丝体多糖的特点 6
2.2.3 蛹虫草菌丝体多糖的功效 7
2.2.4 蛹虫草菌丝体多糖的应用 9
2.3 蛹虫草菌丝体多糖提取方法 9
2.3.1一般提取法 9
2.3.2 超声波提取法 10
2.3.3 微波提取法 10
2.3.4 热回流提取法 11
2.3.5 分级沉淀法 11
2.3.6 超滤膜分离法 11
2.3.7 色谱法 12
2.3.8 季铵盐络合法 12
2.3.9 酸碱提取法 12
2.4 蛹虫草菌丝体多糖的测定方法 13
2.4.1 气相色谱法 13
2.4.2 高效液相色谱法 13
2.4.3 苯酚-硫酸法 13
2.4.4 离子色谱法 13
2.4.5 蒽酮比色法 13
2.5 国内外研究的现状 14
2.6 本论文的研究内容及研究意义 14
第三章 试验部分 16
3.1 材料与设备 16
3.1.1 原材料 16
3.1.2 主要仪器 16
3.1.3 主要试剂 16
3.2 试验方法 17
3.2.1蛹虫草菌丝体的培养 17
3.2.2蛹虫草菌丝体的预处理 17
3.2.3蛹虫草菌丝体多糖的提取工艺 18
3.2.4蛹虫草菌丝体多糖提取方法的比较 19
3.2.5蛹虫草菌丝体多糖提取工艺的优化（热水浸提法） 19
3.2.6 蛹虫草菌丝体多糖的检测 20
3.3 结果与讨论 22
3.3.1葡糖糖标准曲线的绘制 22
3.3.2 蛹虫草菌丝体多糖提取方法的比较 23
3.3.3热水浸提法提取蛹虫草菌丝体多糖的单因素分析 23
3.3.4正交试验法优化热水浸提法提取蛹虫草菌丝体多糖 27
第四章 结论与展望 28
4.1 结论 28
4.2 展望 28
致 谢 30
参考文献 31
蛹虫草是一种著名的传统中草药，性平味甘，具有补肾滋肺、化痰止血的功效。近年来研究结果表明：蛹虫草是冬虫夏草的重要人工替代品，其在降血脂，防治动脉硬化，镇静催眠，保护心、脑组织，增强巨噬细胞活性，抗癌、抗菌、抗缺氧、抗炎等方面具有良好的功效。蛹虫草的药理药效作用与天然冬虫夏草基本一致，甚至要好于天然冬虫夏草。其子实体中富含虫草多糖和虫草素等重要的生理活性成分。
自从1969年，日本学者千原从香菇子实体中提取出了一种具有抗肿瘤的活性多糖以来，世界便掀起了从真菌中探求抗肿瘤成分的高潮。蛹虫草菌丝体多糖作为蛹虫草中重要的活性成分，自然成为了人们研究的热点。据报道,蛹虫草菌丝体所含的多糖是免疫促进物质，而且是目前发现的最佳免疫促进剂之一。因此，蛹虫草菌丝体多糖备受人们青睐，对其研究也已成为食品科学、医药、分子生物学等领域开发应用和研究的热点。国内外的学者针对蛹虫草多糖的结构以及生物学活性开展了大量的研究工作，而且已经证实蛹虫草多糖具有提高免疫力、抗衰老，对特异性、非特异性、体液免疫和细胞免疫均有显著增强作用，还有降低血乳酸和血清尿素氮水平的作用。但现阶段，蛹虫草菌丝体多糖产品的开发仍然很少，其远远比不上其他的药用真菌例如灵芝、冬虫夏草等。最主要原因的是针对蛹虫草菌丝体多糖提取技术研究开发还较少，无法进行工业化生产应用。技术问题是主要克服现有的技术不足，提供一种低成本，而且对环境污染小的蛹虫草菌丝体多糖的提取方法，从而使蛹虫草多糖能被有效地提取、避免单一的提取给蛹虫草活性成分带来损失，以提高蛹虫草的综合利用度，降低投资与运行成本，最大限度地发挥蛹虫草的综合经济效益。
因此，本实验开展对蛹虫草菌丝体多糖提取工艺的研究和优化，为工业化规模性生产蛹虫草菌丝体多糖提供理论依据。